test 2 PCR

¿Qué es la PCR?. Técnica para separar ADN por tamaño. Técnica para amplificar fragmentos específicos de ADN.

¿Cuál es el objetivo principal de la PCR?. Amplificar una región específica de ADN. Secuenciar ADN completo.

¿Quién desarrolló la técnica de PCR?. James Watson. Kary Mullis.

¿Qué tipo de molécula se amplifica mediante PCR?. ADN. Proteínas.

¿Por qué la PCR es considerada una técnica de amplificación?. Porque separa moléculas. Porque aumenta la cantidad de ADN a partir de una pequeña muestra.

¿Qué significa amplificación exponencial?. Que el ADN aumenta linealmente. Que la cantidad de ADN se duplica en cada ciclo.

¿Qué papel cumple la ADN polimerasa en la PCR?. Desnaturalizar el ADN. Sintetizar nuevas cadenas de ADN.

¿Por qué la PCR puede realizarse en el laboratorio y no dentro de una célula?. Porque requiere cambios extremos de temperatura controlados. Porque no necesita ADN.

¿Qué se entiende por ADN molde?. El ADN que se desea amplificar. El ADN recién sintetizado.

¿Qué es un termociclador?. Equipo que separa ADN por tamaño. Equipo que controla automáticamente los ciclos de temperatura de la PCR.

¿Cuáles son los componentes esenciales de una reacción de PCR?. ADN molde, cebadores, dNTPs, ADN polimerasa, buffer y Mg²⁺. ARN, ribosomas y ATP.

¿Qué función cumplen los cebadores (primers)?. Iniciar la síntesis de ADN proporcionando un extremo 3’ libre. Cortar el ADN.

¿Por qué se necesitan dos cebadores y no uno solo?. Para amplificar ambas hebras del ADN en direcciones opuestas. Para aumentar la temperatura.

¿Qué función tienen los dNTPs en la PCR?. Actuar como fuente de energía. Ser los bloques de construcción del ADN nuevo.

¿Por qué se utiliza comúnmente la Taq polimerasa?. Porque funciona a bajas temperaturas. Porque es termoestable y resiste altas temperaturas.

¿Qué pasaría si faltara Mg²⁺ en la reacción?. La ADN polimerasa no funcionaría correctamente. El ADN se duplicaría más rápido.

¿Qué función cumple el buffer de reacción?. Mantener condiciones óptimas de pH e ionicidad. Teñir el ADN.

¿Qué características debe tener un buen cebador?. Ser corto, específico y complementario a la secuencia objetivo. Tener cualquier secuencia.

¿Qué sucede si los cebadores no son específicos?. Se obtiene amplificación inespecífica. No ocurre ninguna amplificación.

¿Por qué es importante la concentración de reactivos?. Porque afecta la eficiencia y especificidad de la PCR. Porque no influye en el resultado.

¿En qué consiste la etapa de desnaturalización?. Separación de las dos hebras del ADN por alta temperatura. Unión de cebadores.

¿Qué ocurre durante la etapa de alineamiento (hibridación)?. Los cebadores se unen al ADN molde. Se sintetiza ADN.

¿Por qué la temperatura de alineamiento es crítica?. Determina la especificidad de unión de los cebadores. Aumenta la fluorescencia.

¿Qué sucede durante la etapa de extensión?. La ADN polimerasa sintetiza la nueva cadena de ADN. Se separan las hebras.

¿Por qué la extensión se realiza aproximadamente a 72 °C?. Porque es la temperatura óptima de la Taq polimerasa. Porque el ADN se desnaturaliza.

¿Qué pasaría si la temperatura de desnaturalización fuera muy baja?. El ADN no se separaría completamente. Se duplicaría más rápido.

¿Cuántos ciclos se realizan normalmente en una PCR?. Entre 25 y 40 ciclos. Más de 100 ciclos.

¿Cómo aumenta la cantidad de ADN con cada ciclo?. De forma exponencial. De forma aleatoria.

¿Qué ocurriría si se reduce el número de ciclos?. Se obtendría menos producto amplificado. Se pierde especificidad.

¿Por qué cada ciclo duplica la cantidad de ADN?. Porque cada molécula sirve como molde para dos nuevas moléculas. Porque aumenta la temperatura.

¿Diferencia entre PCR convencional y PCR en tiempo real (qPCR)?. La qPCR permite cuantificar ADN en tiempo real. La PCR convencional es más rápida.

¿Qué información adicional proporciona la qPCR?. Cantidad inicial de ADN o expresión génica. Secuencia completa del ADN.

¿Qué es la RT-PCR y cuándo se utiliza?. PCR para amplificar ARN directamente. Técnica que convierte ARN en ADNc para su amplificación.

¿Por qué es necesario convertir el ARN en ADN antes de la PCR?. Porque la ADN polimerasa solo amplifica ADN. Porque el ARN es más estable.

¿Qué es la PCR multiplex?. Amplificación de un solo gen. Amplificación simultánea de varias secuencias en una sola reacción.

¿Qué ventajas tiene la PCR anidada?. Mayor especificidad y sensibilidad. Menor tiempo de reacción.

¿Qué limitaciones presenta la PCR convencional?. No es cuantitativa y es susceptible a contaminación. No amplifica ADN.

¿Por qué la PCR es altamente sensible?. Porque puede amplificar ADN a partir de cantidades mínimas. Porque usa voltajes altos.

¿Cómo se evita la amplificación inespecífica?. Optimizando cebadores y temperaturas de alineamiento. Aumentando ciclos sin control.

¿Qué factores influyen en la eficiencia de la PCR?. Diseño de cebadores, calidad del ADN y condiciones de reacción. Color del tubo.

¿Por qué la PCR revolucionó la biología molecular?. Porque permite analizar ADN de forma rápida y precisa. Porque reemplazó la electroforesis.

¿En qué situaciones la PCR no sería adecuada?. Cuando se necesita información espacial en tejidos intactos. Cuando hay poco ADN.

¿Qué ventajas tiene la PCR frente a métodos tradicionales?. Rapidez, sensibilidad y especificidad. Mayor costo y complejidad.

¿Cómo se complementan la PCR y la electroforesis?. La PCR amplifica y la electroforesis permite visualizar los productos. Ambas hacen lo mismo.

¿Por qué el diseño de cebadores es crítico para el éxito de la PCR?. Determina la especificidad, eficiencia y exactitud de la amplificación. Solo influye en el color de las bandas.