cual es el primer paso en la preparacion de una muestra de tejido u organo.
fijador mas habitual.
que paso detiene el metabolismo celular.
que paso impide la degradacion enzimatica de las celulas y los tejidos por autolisis (autodigestion).
que paso destruye microorganismos patógenos, como bacterias, hongos o virus.
que paso endurece el tejido como resultados de la formación de enlaces cruzados o de la desnaturalización de moléculas de proteínas.
conserva la estructura general de la celula y de los componentes extracelulares al reaccionar con grupos aminos de las proteinas (a menudo con los enlaces cruzados de residuos de lisina).
no altera la estructura tridimensional ayudando a las proteínas que mantengan su capacidad para reaccionar con anticuerpos específicos .
su solucion comercial estandar amortiguado con fosfatos (pH7) actua con lentitud, pero penetra bien en el tejido.
el formaldehido no reacciona con los lipidos, siendo un mal fijador de.
que sucede en el segundo paso de la preparación del tejido.
para examinar una muestra, se requiere de su infiltración con un medio de inclusión que permita realizar cortes muy finos en un rango de 1 - 5 μm 5 - 15 μm 7 - 15 μm.
después de la fijacion la muestra se lava y se deshidrata en una serie de disoluciones de _______ , cuya concentración se incrementa al 100% para remover el agua.
en el siguiente paso se utilizan solventes orgánicos como el xileno o tolueno, para extraer el alcohol antes de la infiltración de la muestra con la parafina fundida.
solventes orgánicos miscibles tanto en alcohol como en parafina.
cuando la parafina se a enfriado y endurecido, se corta para formar un bloque y este bloque se coloca en una maquina cortadora llamada.
es una solucion que se endurece en un montaje permanente y mantiene la muestra unida al vidrio, lo que evita su deterioro .
los medios de montaje permanente no acuosos empleados con mayor frecuencia son.
los medios de montaje de base acuosa se usan en inmunocitotoquímica e incluye productos a base de .
que sucede en el tercer paso de la preparación del tejido .
Para teñir los cortes histológicos, la parafina debe _______ y _______ , con ______ o _______, y los ejidos deben _______ mediante una serie de disoluciones de ________ con concentraciones decrecientes.
el tejido sobre el portaobjetos se tiñe con .
colorante de contraste que es mas soluble en alcohol que en agua.
despues de ser teñido con hematoxilina en agua se vuelve a _______ la muestra a través de una serie de disoluciones _______ de concentración crecientes y después se tiñe con ________ en alcohol.
una vez teñida la muestra se pasa por ______ o ______ y se coloca en un medio de montaje _________ encima antes de cubrirla con un cubreobjetos para obtener un preparado permanente.
que fijadores se usan para conservar las estructuras de la membrana uniéndose a los fosfolipidos.
para conservar los lípidos neutros, como los de las células adiposas, deben ampliarse cortes por congelación de tejido fijado en.
como fijador en la microscopia electronica es la razón principal del excelente estado de conservación de las membranas en las micrografías electrónicas.
para que se usan la hematoxilina y la eosina.
a pesar de las ventajes de la tincion con hematoxilina y eosina no permite ver de forma adecuada ciertos componentes estructurales de los cortes histologicos.
en la tincion para el material elastico se incluye.
en la tincion para las fibras reticulares y las membranas basales se incluye.
formadas por acidos nucleicos unidos a proteinas.
proteinas intracelulares del citoesqueleto en complejo con.
en grandes agregados insolubles, unidos a moleculas similares mediante enlaces cruzados de moleculas vecinas, como ocurre en la formacion de las fibras de colageno .
son ejemplos de grandes complejos de macromoleculas, constituyen la estructura de la celula y tejidos, es decir son los elementos celulares del tejido. Son la base de la organizacion del tejidos que se observa en el microoscopio .
son los componentes estructurales visibles de las proteinas que ademas participan en el proceso de contraccion.
generalmente desaparecen durante la preparación del tejido.
moleculas que se pierden durante la fijacion de rutia en fijadores acuosos son.
hidrato de carbono intracelular abundante en el higado y las celulas musculares .
hidratos de carbono complejos extracelulares que se encuentran en el tejido conjuntivo.
el glucogeno, proteoglucanos y glucosaminoglucanos se pueden conservar si se utilizan fijadores.
que se pierden durante la preparacion de muestra de parafina teñidas con H&E.
estabiliza la estructura macromolecular a traves de uniones de hidrogeno.
que colorante tiene una carga negativa en su parte coloreada y se describe con la formula general [colorante Na+].
que colorante tiene una carga neta positiva en su parte coloreada y se describe con la formula general [colorante Cl- ].
completa eosina hematoxilina.
colorantes basicos verde de metilo azul de metilo pironina G azul de toluidina.
colorantes acidos fucsina acida anilina azul eosina naranja G.
reaccionan con los componentes anionicos de las celulas y de los tejidos.
incluyen los grupos fosfato de los acidos nucleicos, los grupos sulfato de los glucosaminoglucanos y los grupos carboxilo de las proteinas.
la capacidad de estos grupos anionicos para reaccionar con el colorante basico se denomina.
en este pH los tres grupos estan ionizados y disponibles para la reaccion con el colorante basico mediante uniones electrostaticas.
en este pH los grupos fosfato y sulfato estan ionizados y disponibles para reaccionar con el colorante basico a traves de uniones electrostaticas.
en este pH solo los grupos sulfato a mantienen ionizados y reaccionan con un colorante basico.
la hematoxilina no es un colorante basico en sentido estricto empleandose como un.
el mordiente hace que .
la union en el complejo _______ no es un simple enlace _______ ; cuando los cortes se colocan en _______ , la _________ no se disocia del tejido.
la hematoxilina es adecuada para procedimientos tintoriales en las que dicha tincion viene seguida por .
reaccionan con los grupos catiónicos en la celulas y los tejidos, en particular, con los grupos amino ionizados de las proteinas.
la reaccion de los grupos carionicos con un colorante acido recibe el nombre de .
en esta tecnica se emplean tres colorantes acidos: anilina azul, fucsina acida y naranja G.
la fucsina acida tiñe a.
hay pocas sustancias dentro de las celulas y en la matriz extracelular que presentan basofilia en estas se incluyen.
la tincion con colorantes acidos es menos especifica, pero mas sustancias dentro de las celulas y en la matriz extracelular presentan acidofilia en estas se incluyen .
ciertos colorantes basicos reaccionan con componentes tisulares que cambian su color normal de azul a rojo o purpura; este cambio de la absorbancia se llama .
el mecanismo subyacente para la metacromasia es la presencia de este en el tejido.
cuando estos se tiñen con azul de toluidina se observara de purpura a rojo .
la capacidad de la fucsina basica decolorada (reactivo se Schiff) para reaccionar con los grupos aldehido causa la aparicion de un color .
tiñe hidratos de carbono y macromoleculas, se usa para el glucógeno en las celulas, el moco en diversas celulas y tejidos, y la membrana basal subyacentes en epitelios y fibras reticulares en el tejido conjuntivo.
este reactivo se utiliza en la reaccion de feulgen.
que significa PAS.
la reaccion PAS tiene los siguientes fundamentos. Los anillos de _______ de los _______ de ________ contiene carbnos _______ cada uno de los cuales lleva un grupo ________ . Las hexosaminas de los ___________ contienen carbonos contiguos, uno de los cuales lleva un grupo ________, mientras que el otro lleva un grupo _______. El acido ________ escinde la union entre estos atomos de carbono contiguos y forma grupos ________. Estos grupos _______ reaccionan con el reactivo de _______ para dar un color ______ distintivo.
la tincion PAS de la membrana basal y las fibras reticulares se basa en el contenido o asociacion de .
esta tinción es una alternativa a los métodos de impregnación argéntica .
se basa en la escisión de las purinas de la desoxirribosa del ADN mediante hidrolisis acida débil; el anillo sacárido se abre y forma grupos aldehídos.
una vez mas los grupos aldehidos recien formados reaccionan conel reactivo de schiff para generar el color purpura caracteristico. La reaccion del reactivo de schiff con el ADN es.
el ARN no se tiñe con reactivo de schiff por que carece de .
puede usarse para confirmar la identidad del material que se tiñe.
el material intracelular que se tiñe mediante la reaccion de PAS puede identificarse como ______ a traves del tratamiento previo de los cortes con _______ o _______. La falta de tincion despues de este tratamiento identifica de manera ________ el material teñido como ________.
las tecnicas histoquimicas tambien se utilizan para identificar y localizar.
en estos procedimientos se detecta el prducto de reaccion de la actividad enzimática y no la enzima. Se utiliza un reactivo de captura, ya sea un colorante o un metal pesado, para atrapar o fijar el prducto de la reaccion de la enzima mediante su precipitacion en el sitio de reaccion .
en que reaccion se usa que el corte histologico se coloca en una solucion que contiene un sustrato AB y un agente T el acual precipitara uno de los productos de la siguinte manera: AB + T --- AT + B se muestra AT como el producto final capturado y B es el sustrato hidrolizado .
que se muestra en la siguiente formula AB + T --- AT + B .
uno de los metodos histoquimicos mas habituales y se usa para la deteccion de antogenos medida por enzimas.
un sustrato altamente utilizado para la peroxidasa de rabano es .
tambien son llamados inmunoglobulinas, siendo glucoproteinas producidas por celulas especificas del sistema inmunitario como respuesta a una proteina extraña o atigeno .
en laboratorio los anticuerpos pueden purificarse de la sangre y conjugarse con un colorante.
son productos quimicos que absorben la luz de diferentes longuitudes de onda y luego emiten y luego emiten luz visible de una longuitud de onda especifica.
el colorante mas utilizado, absorbe la luz ultravioleta y emite luz verde.
la reaccion del anticuerpo con el antigeno puede observarse con que tipo de microscopio.
en la inmunocitoquimica se utilizan dos tipos de anticuerpos: policlonales monoclonales .
cuando se identifica un antigeno estraño se desencadenan una cascada de reacciones inmunitarias que activan multiples grupos de celulas inmunitarias llamadas .
si el antigeno extraño se encuentra presente en una celula o tejido el anticuerpo se convierte tumor derivado de una sola celula plasmatica productora de anticuerpos como se le llama a este.
la fusion de los linfocitos B y el mieloma produce una linea celular individual inmortalizada que secreta anticuerpos.
la fusion de linfocitos B y mieloma se obtienen .
esta tecnica emplea un anticuerpo primario arcado con fluorocromo que reacciona con el antigeno dentro de la muestra, este metodo involucra un unico anticuerpo marcado.
recibe el nombre de tecnica del emparedado o de la capa doble, el flurocromo se conjuga con un anticuerpo secundario dirigido con el anticuerpo primario , aumentando la emision de la señal de fluorescencia del tejido.
en este se puede utilizar para localizar la union especifica de tejido de diferentes anticuerpos primarios.
la tincion que resulta del metodo de inmunoperoxidasa se puede observar en el microscopio.
el oro coidal y la ferritina pueden unirse a la molecula de anticuerpo y estos marcadores electrodensos pueden observarse en el microscopio.
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