1.Una de las aplicaciones de la PCR en todos los campos de la biología, medicina y paleontología son: Genotipado. Estudios de expresión genética. Diagnóstico y pronóstico de ciertas enfermedades. Todas son correctas.
2.Ventajas de la PCR y variantes con otras técnicas utilizadas en biología molecular: La PCR supone un considerable ahorro de tiempo con respecto a la clonación y necesita una cantidad de muestra menor con respecto a las técnicas de hibridación. La PCR supone un considerable pérdida de tiempo con respecto a la clonación y necesita una cantidad de muestra menor con respecto a las técnicas de hibridación La PCR supone un considerable ahorro de tiempo con respecto a la clonación y necesita una cantidad de muestra mayor con respecto a las técnicas de hibridación La PCR supone un considerable ahorro de tiempo con respecto a las técnicas de hibridación y necesita una cantidad de muestra menor con respecto a la clonación.
3.La PCR... Técnica in vitro de reducción de ADN Técnica in vitro de amplificación de ADN Se obtiene una sola copia iene que haber mucha cantidad de ADN.
4.¿Cuál de estos es un variante de la PCR? Amplificar varios fragmentos distintos en una única reacción (PCR múltiples) Amplificar fragmentos de ARN(RT-PCR) Cuantificar la concentración de una molécula concreta de ácido nucleico presente en una muestra ( PCR cuantitativo, PCR a tiempo real)
Todas son correctas
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5. ¿Qué es la PCR? (a) Proceso enzimático, catalizado por una ADN polimerasa, basado en la replicación del ADN. (b) En este proceso, las copias nuevas obtenidas en cada ciclo sirven de molde para replicar otras nuevas copias.
Las respuestas a y b son correctas.
En este proceso se unen la hebra molde que tiene dirección 3’-5’.
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6. ¿Qué hecho posibilitó el descubrimiento de las ADN polimerasas termoestables?
Un pequeño desarrollo de la PCR en poco tiempo.
Un desarrollo espectacular de la PCR en un largo periodo de tiempo.
Un desarrollo espectacular de la PCR en poco tiempo.
Ninguna es correcta.
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7. ¿ A cuántos grados mantienen el adn su actividad polimerasa?
90ªC 85ªC
80ªC 95ªC.
8. ¿ En función de que se clasifica la ADN polimerasa termoestable?
De sus capacidades enzimáticas cuaternarias
De sus capacidades enzimáticas primarias
De sus capacidades enzimáticas terciarias
Ninguna es correcta
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9 . ¿Por que la pcr es la clave de la amplificación?
(a) Las copias nuevas sirven de molde para sintetizar otras nuevas.
(b)Las copias nuevas no sirven de molde para sintetizar otras nuevas.
(c)Aumento exponencial en el numero de copias
A y c son correctas.
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10. ¿ Cuáles de los siguientes aspectos no hay que estudiar en profundidad para entender el funcionamiento de la PCR estándar o convencional?
Programación del termociclador.
Composición de la mezcla del gel.
Análisis de los productos de reacción.
Composición de la mezcla de reacción.
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11. ¿Qué son los cebadores o primers?
Oligonucleotidos monocatenarios.
Oligonucleotidos bicatenarios
Oligoelementos Nucleòtidos monocatenarios
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12 . ¿Cuál es la temperatura óptima de la actividad de la polimerasa?
Entre 50 y 55 grados
Entre 60 y 65 grados
Entre 70 y 75 grados
Entre 90 y 95 grados
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13. ¿cuales son los tipos de ADN polimerasa termoestables?
Actividad exonucleasa 5’-3’ pero sin actividad 3,-5’
Actividad exonucleasa 5’-3’ y actividad 3’-5’
Actividad transcriptasa inversa
Todos son correctas
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14. ¿Qué fases forman un ciclo de PCR?
Desnaturalización del ADN molde, amplificación de ácidos nucleicos.
Desnaturalización del ADN molde, Hibridación de los cebadores con el ADN molde y extensión de cebadores.
Desnaturalización del ADN molde, hibridación de los cebadores con el ADN molde.
Hibridación de los cebadores y extensión del ADN.
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15. El tiempo estándar de la fase de hibridación oscila:
Entre 30 y 60 segundos.
Entre 1 hora y 2 horas.
Entre 1,30 hora y 2 horas.
Entre 1 minuto y 2 minutos.
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16. ¿Cuál es el resultado final de cada ciclo de una PCR?
La síntesis de una molécula de ARN nueva por cada fragmento de ARN molde.
La síntesis de una molécula de ADN nueva por cada fragmento de ARN molde.
La síntesis de una molécula de ADN nueva por cada fragmento de ADN molde.
La síntesis de una molécula de ARN nueva por cada fragmento de ADN molde.
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17. En cuanto a las fases de un ciclo de PCR:
La fase de desnaturalización se realiza a 94-95ºC durante 15-30 segundos. El tiempo de la fase de extensión depende únicamente de la velocidad de polimerización de la enzima.
La fase de metabolización es la principal de las fases de la PCR.
El tiempo de la fase de extensión depende únicamente del tamaño del fragmento que se va a amplificar.
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18.¿Cuál es el tiempo y la temperatura idónea para una fase de desnaturalización?
80°C durante 15 - 30 segundos.
50°C - 65°C durante 30 - 60 segundos.
72°C durante 30 - 45 segundos.
Ninguna es correcta.
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19. El tiempo de extensión está condicionado por…
(a)Por la velocidad de polimerización de la enzima.
(b) Por la longitud del fragmento que se va a amplificar.
(c)Por el grado de desnaturalización del ADN a amplificar.
a y b son correctas.
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20. ¿Qué ocurre en el primer ciclo de PCR?
Hibridación y renaturalización.
Se unen las moléculas de ADN nativa.
El cebador se separa de la secuencia diana.
Fase de desnaturalización inicial, fase de hibridación, fase de extensión, y resultado final.
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21. ¿Qué ocurre en el 2º ciclo de PCR?
Fase de desnaturalización, fase de hibridación y extensión y resultado final.
Se asocia la estructura de doble hélice.
Las cadenas no se corresponden al fragmento que queremos amplificar.
Las cadenas se corresponden al fragmento que queremos amplificar.
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22. Al finalizar la PCR…
El número de productos no deseados será 2n
El número de productos no deseados será 3d
El número de productos no deseados será 7n
El número de productos no deseados será 3n
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23. El rendimiento de la técnica …
siempre es del 60%
siempre es del 100%
nunca es del 100%
siempre es del 20%
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24. ¿Qué resultado final se obtiene en el primer ciclo de la amplificación de la PCR?
2 productos deseados y 0 productos no deseados.
1 producto no deseado y 0 productos deseados.
Ninguna es correcta
0 productos no deseados y 1 producto deseado.
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25. En el tercer ciclo de amplificación de PCR, indica cual de estas frases es la incorrecta:
Las moléculas A+/A- son los productos deseados.
El resultado final son 6 productos no deseados y 2 amplicones. Todas son incorrectas
En la fase de desnaturalización se obtienen 5 hebras molde
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26. Las etapas principales de la programación del termociclador para amplificar fragmentos de ADN mediante PCR estándar son:
a-Desnaturalización inicial, ciclos de replicación y extensión final.
b-Desnaturalización, hibridación de cebadores y extensión.
c-Mantenimiento.
La a y la c son correctas.
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27. El mantenimiento de la programación del termociclador:
Finaliza siempre con una última incubación.
Se realiza a 4°C.
No tiene límite de tiempo.
Todas son correctas.
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28. ¿ Cuáles de los siguientes aspectos no hay que estudiar en profundidad para entender el funcionamiento de la PCR estándar o convencional?
Programación del termociclador.
Composición de la mezcla del gel.
Análisis de los productos de reacción.
Composición de la mezcla de reacción.
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29. Elige la respuesta correcta:
El tampón aporta el Ph y la concentración salina adecuados para la óptima actividad del ARN polimerasa con un máximo de fidelidad.
Una concentración excesivamente baja determina una menor fidelidad en la replicación.
Los cuatro dNTPs deben estar presentes en la misma concentración. La ARN polimerasa es el otro reactivo clave para realizar una PCR con éxito.
30. ¿Qué determina la inactividad de las ADN polimerasas?
Una concentración excesivamente alta de iones de magnesio
Una concentración excesivamente baja o inexistente de iones de magnesio
Una concentración alta de cloruro de magnesio
Una concentración baja de cloruro de magnesio
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31. ¿Cómo debe ser la concentración final de referencia para cada cebador en la mezcla de reacción?
Entre 200 y 400 nM
Entre 400 y 300 nM
Entre 100 y 600 nM
Entre 450 y 530 nM .
32. Aspectos a estudiar para entender en profundidad la PCR estándar o convencional:
Composición de la mezcla de reacción
Programación del termociclador
Análisis de los productos de reacción
Todas son correctas
.
33. ¿Qué aporta el tampón en una reacción?
PH
Concentración salina
Ambas son ciertas
Ninguna es cierta
.
34. ¿De qué va a depender la elección de la ADN polimerasa?
De la fidelidad requerida en la amplificación
De la longitud del fragmento
De la secuencia que se va a amplificar
Todas son correctas.
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35. ¿De qué depende que la PCR se desarrolle de manera óptima?
Cantidad
Calidad
Calidad y cantidad
Concentración .
36 . La preparación de las muestras requiere:
Ajustar el volumen de la reacción
Elaborar la mezcla máster
Establecer los controles positivos y negativo
Todas son correctas.
.
37. ¿Cuándo es necesario que se añada ADN molde en el control de la técnica de PCR?
No es necesario añadir ADN molde
En el Control Negativo
En el Control Positivo.
En ambos controles se añade ADN molde
.
38. Elige la respuesta correcta:
a-Control positivo es un tubo con mezcla máster al que se añade ADN molde control.
b-Control negativo es un tubo con mezcla máster en el que se sustituye el ARN molde por agua de grado PCR.
c-Control negativo es un tubo con mezcla máster en el que se sustituye el ADN molde por agua de grado PCR.
A y C son correctas.
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39. Para conseguir que la composición de la mezcla de reacción sea homogénea para todas las pruebas es preferible:
Preparar una única mezcla de reacción
La mezcla de reacción se denomina mezcla máster
La mezcla debe incluir todos los componentes excepto ADN molde.
Todas son correctas
.
40. ¿Cuáles son las etapas principales en la programación del termociclador para amplificar un fragmento de ADN mediante PCR?
Ciclos de replicación, desnaturalización y mantenimiento
Ciclos de replicación y extensión.
Desnaturalización y ciclos de replicación
Todas son correctas.
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41. ¿Cuál es la temperatura de incubación para mantener las muestras hasta que se retiren del termociclador?
5ºC 7ºC
4ºC
-4ºC
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42.¿Qué indica que la PCR ha funcionado adecuadamente?
La presencia de dos bandas del mismo tamaño.
La presencia de una única banda de un tamaño inadecuado.
La presencia de dos bandas de distinto tamaño.
La presencia de una única banda de tamaño adecuado
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43. ¿Cuál de las siguientes PCR no es una modalidad estándar?
PCR con inicio caliente.
PCR de grandes fragmentos.
PCR anidada.
PCR de alta fidelidad.
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44. En el resultado positivo del análisis de los productos amplificados…
Se procesa un control negativo o blanco, en el que el ADN molde se sustituye por agua de grado PCR.
En el gel de electroforesis, la calle correspondiente al blanco debe aparecer limpia, sin bandas.
Si detecta alguna banda, indica contaminación de algún reactivo.
Todas son correctas
.
45. En el resultado negativo del análisis de los productos amplificados…
La ausencia de banda específica en una muestra problema indica que el resultado sería negativo.
La ausencia de banda específica en una muestra problema indica que el resultado sería positivo.
Para descartar la presencia de inhibidores en una muestra hay que realizar un control negativo.
Si el control positivo de la muestra no amplifica, la muestra es apta.
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46. ¿Para qué se utiliza la PCR estandar mayoritariamente?
Para fines pronosticos
Para fines bioquímicos
Para fines diagnósticos
Para fines enzimáticos
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47. ¿Cuál es la forma más sencilla de prepara la mezcla de reacción en la PCR?
Con ADN polimerasa
Sin ADN polimerasa
Con ARN polimerasa
Sin ARN polimerasa
.
48. Para polimerizar con éxito fragmentos de gran tamaño en el momento de programar el termociclador hay que:
Disminuir considerablemente el tiempo de extensión en cada ciclo.
Aumentar los tiempos de desnaturalización
Aumentar considerablemente el tiempo de extensión en cada ciclo.
Ninguna es correcta
.
49. PCR de grandes fragmentos:
Es una variante de la PCR que permite aumentar el rendimiento cuando se amplifican fragmentos de entre 5 y 35 kb
Es una variante de la PCR que permite disminuir el rendimiento cuando se simplifican fragmentos de entre 5 y 35 kb.
Es una variante de la PCR que permite aumentar el rendimiento cuando se amplifican fragmentos de entre 5 y 40 kb
Ninguna es correcta
.
50. Las PCR de alta fidelidad son PCR realizadas en condiciones:
Especiales para evitar introducir en los amplicones mutaciones puntuales por incorporación de nucleótidos erróneos.
Estándar para evitar introducir en los amplicones mutaciones puntuales por incorporación de nucleótidos erróneos.
Especiales para evitar introducir en los amplicones mutaciones puntuales por incorporación de nucleótidos concretos.
Inespecíficas para introducir los amplicones mutaciones puntuales por incorporación de nucleótidos erróneos.
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51. Las variaciones que se pueden aplicar en la composición de la mezcla de reacción en la PCR de alta fidelidad son : Utilización de ADN polimerasas termoestables con actividad correctora. Favorecer las condiciones óptimas de mayor fidelidad de la enzima Ajustando PH y la concentración de Mg 2+ Todas son correctas.
52. La PCR cuantitativa:
a-No permite cuantificar la cantidad inicial de una molécula de ácido nucleico.
b-El Cp de una muestra de directamente proporcional a la cantidad inicial de la molécula.
c-El termociclador a tiempo real detecta el ciclo PCR en el cual la fluorescencia de la muestra alcanza el valor por encima del límite de detección.
A y C son correctas
.
53. La curva de fusión:
Es la gráfica que se obtiene representando fluorescencia frente a la concentración.
Se realiza antes de haber concurrido la PCR. Se baja la temperatura hasta 40-45 °C para obtenerla.
Ninguna es correcta
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54.Señala la respuesta correcta:
a-Al conseguir con la PCR altos niveles de amplificación en tiempos largos y su mayor sensibilidad de detección sea convertido en la técnica básica de cualquier laboratorio de biología molecular.
b-Una de sus aplicaciones es el diagnóstico de ciertas enfermedades
c-Conseguimos altos niveles de amplificación en tiempos cortos
b y c son correctas.
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55.Son aplicaciones de la PCR
La evolución y respuesta a tratamientos.
Los estudios de expresión génica.
Mutagénesis.
Todas son correctas
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56. Señala la respuesta correcta:
a-La PCR se basa en la repetición secuencial de ciclos de replicación.
b-Cada ciclo consta de tres fases: Desnaturalización, hibridación y extensión.
c-Se basa en la renaturalización exclusivamente.
a y b son correctas.
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57. Cuando el rendimiento de la PCR es bajo o aparecen amplificados productos no deseados es debido a:
La presencia de contaminantes.
A la naturaleza del ADN molde o de los cebadores.
A su secuencia.
Todas son correctas.
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58. Cuando el rendimiento de la PCR es bajo se pueden añadir a la mezcla:
Diversos aditivos que actúan como potenciadores de la PCR, aumentando el rendimiento de la reacción y aumentando la aparición de productos no deseados.
Estos aditivos y potenciadores tienen diferentes mecanismos de acción.
Ejercen los mismos efectos beneficiosos en todas las PCR.
Todas son correctas.
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