biologia tema 6

Qué protocolo de síntesis de sondas utiliza el fragmento Klenow de la ADN polimerasa I?. Sondas de oligonucleótidos. Random priming. Nick translation. Ninguno de los anteriores.

¿Qué elementos se precisan para identificar una secuencia específica en un ácido nucleico?. Fosfatasa alcalina (PA) y peroxidasa del rábano (HRP). 32P y 3H. Presencia de la secuencia diana y uso de sonda molecular. Elevada homología y rigor (stringency).

Señale el factor experimental que NO afecta al rigor (stringency). Temperatura de hibridación. Cationes divalentes. PH. Urea.

¿Cuál es la técnica de transferencia más usada en el Southern blot?. Electrotransferencia. Vacío. Capilaridad. todas son correctas.

Señale la opción incorrecta con respecto al Northern blot: No es necesaria la fragmentación del ácido nucleico con endonucleasas. Se emplea para obtener información sobre el tamaño del ADN y el modelo de expresión de genes específicos. La desnaturalización se hace, generalmente, mediante tratamiento con bases. Debe tenerse especial cuidado en evitar la acción de ARNasas.

¿Cuál es la característica distintiva de los arrays de Hibridación Genómica Comparada (aCGH)?. El ácido nucleico analizado es ARN. Los cambios en segmentos < 7-10 Mb no son detectados. Marcar el ADN de la muestra y el de referencia con fluorocromos distintos. Marcar el ADN de la muestra y el de referencia con el mismo fluorocromo.

Señale la opción incorrecta con relación a la FISH: Uno de los factores más influyentes en la calidad de la señal de hibridación es el tipo celular empleado. Los monocitos de sangre periférica parecen haber demostrado un mejor comportamiento ante diferentes tipos de sondas. La detección se hace bajo microscopio de fluorescencia, utilizando contratinción con diamino-fenilindol (DAPI). Las señales fluorescentes indican presencia de ADN cromosómico complementario.

8. ¿Dónde se localiza el ADN α-satélite?. Telómeros. Regiones NOR. Centrómeros. telomeros y centromeros.

Qué color de fluorescencia final de los aCGH indica duplicación de ADN?. rojo. amarillo. verde. ningun.

¿Qué sondas de FISH están diseñadas exclusivamente para cromosomas en metafase?. Locus específico. De pintado cromosómico. De secuencias repetitivas. Locus específico y De secuencias repetitivas.

Una limitación de la FISH es que: No detecta aneuploidías. No usa fluorescencia. Requiere sondas específicas conocidas. No se aplica en clínica.

Las sondas centroméricas se utilizan para: Analizar ARN mensajero. Estudiar el número de cromosomas. Detectar genes concretos. Identificar regiones teloméricas.

El uso de sondas radiactivas se ha reducido principalmente por: Falta de especificidad. Baja sensibilidad. Riesgos para la salud y el medio ambiente. Alto coste.

Una sonda se define como: Una proteína específica. Un anticuerpo fluorescente. Una enzima de restricción. Un fragmento de ácido nucleico marcado.

El Northern blot se utiliza para: Analizar proteínas. Detectar ARN. Visualizar cromosomas. Detectar ADN.

En condiciones de baja stringencia: Se degradan las sondas. No hay hibridación. Solo hibridan secuencias idénticas. Se permite hibridación con algunas discrepancias.

Una ventaja de la FISH frente a la citogenética convencional es: Sustituye completamente al cariotipo. Permite detectar alteraciones submicroscópicas. No necesita sondas. No requiere microscopio.

La hibridación se basa en: Enlaces fosfodiéster. Interacciones iónicas. Interacciones proteína-proteína. Complementariedad de bases nitrogenadas.

La técnica CGH permite: Detectar ganancias y pérdidas de material genético. Analizar proteínas. Amplificar ADN. Visualizar bandeo G.

El Southern blot permite detectar: proteinas. ARN. ADN. cromosomas completos.

El Western blot se emplea para: Hibridar sondas. Amplificar ADN. Detectar ácidos nucleicos. Analizar proteínas.

Las sondas subteloméricas se utilizan para: Detectar ARN. Analizar regiones próximas a telómeros. Marcar cromosomas completos. Identificar centrómeros.

La array-CGH se diferencia de la CGH clásica porque: No detecta desequilibrios. No usa fluorescencia. Emplea microarrays y mayor resolución. Tiene menor resolución.

La FISH en interfase permite: Detectar anomalías sin necesidad de metafases. Analizar proteínas nucleares. Analizar bandeo cromosómico. Sustituir completamente el cariotipo.

Las sondas painting cromosómico se utilizan para: Detectar ARN. Identificar fragmentos pequeños. Analizar proteínas nucleares. Marcar cromosomas completos.

Un aumento de la stringencia provoca: Disminución de la especificidad. Ausencia de desnaturalización. Mayor especificidad de la hibridación. Mayor unión inespecífica.

En un Southern blot, el ADN se transfiere a: Gel de agarosa. Membrana de nitrocelulosa o nylon. Placa multipocillo. Portaobjetos.

La FISH se aplica principalmente en: Bioquímica clínica. Diagnóstico cromosómico. Histología convencional. Microbiología.

La desnaturalización previa a la hibridación tiene como objetivo: Amplificar la secuencia diana. Marcar la sonda. Separar las hebras de ADN. Precipitar ácidos nucleicos.

El procedimiento de hibridación incluye como paso previo: Electroforesis. Traducción proteica. Desnaturalización del ADN. Amplificación por PCR.

Una sonda de ADN puede ser: Bicatenaria obligatoriamente. Exclusivamente monocatenaria. De ADN o ARN. Siempre radiactiva.

Un ejemplo de marcador no radiactivo es: ³H. ³²P. ¹²⁵I. Biotina.

La stringencia de la hibridación depende de: Método de tinción. Tamaño del gel. Tipo de enzima. Temperatura y concentración salina.

El lavado post-hibridación sirve para: Desnaturalizar el ADN. Amplificar la señal. Marcar cromosomas. Eliminar sondas unidas inespecíficamente.

Las técnicas de transferencia a soporte sólido incluyen: PCR y RT-PCR. Southern y Northern blot. Electroforesis capilar. Bandeo cromosómico.

Un aumento de la concentración salina durante la hibridación: Disminuye la stringencia. Aumenta la stringencia. No afecta a la hibridación. Impide la desnaturalización.

La función principal de una sonda es: Amplificar ADN. Degradar ácidos nucleicos. Separar fragmentos. Detectar secuencias complementarias.

En la técnica FISH, las sondas se hibridan: En tubos de PCR. En membranas. Directamente sobre cromosomas o núcleos. Sobre geles.

La biotina como marcador indirecto se detecta mediante: Enzimas de restricción. Fluorescencia directa. Anticuerpos o avidina. Espectrofotometría.

La renaturalización o hibridación ocurre cuando: Se rompen enlaces fosfodiéster. Se degradan nucleótidos. Se unen proteínas al ADN. Se aparean secuencias complementarias.

El marcado directo de una sonda implica: Incorporación directa de un marcador a la sonda. Ausencia de señal detectable. Uso exclusivo de enzimas. Uso de anticuerpos secundarios.

La FISH (hibridación in situ fluorescente) permite: Secuenciar ADN. Analizar proteínas. Amplificar genes. Detectar secuencias específicas en cromosomas o núcleos.

Una aplicación clínica de CGH/array-CGH es: Diagnóstico de síndromes por deleciones/duplicaciones. Cultivo celular. Análisis proteómico. Estudio de expresión génica.

Las sondas locus-específicas permiten: Detectar regiones heterocromáticas. Identificar cromosomas completos. Analizar genes concretos. Medir el tamaño del ADN.

Una aplicación clínica de las técnicas de hibridación es: Diagnóstico de anomalías cromosómicas. Determinación de grupos sanguíneos. Medición de glucosa. Análisis enzimático.

El dot blot se caracteriza por: Separación previa por tamaño. Visualización cromosómica. Uso exclusivo de proteínas. Ausencia de electroforesis.

En el Northern blot, el ARN debe: Mantenerse bicatenario. Fijarse con formaldehído. Ser amplificado por PCR. Ser previamente desnaturalizado.

El marcado indirecto se caracteriza por: Ser exclusivo de FISH. Ausencia de señal. Necesidad de un sistema de detección adicional. Uso de fluorocromos directamente.

La FISH es especialmente útil para detectar: Proteínas alteradas. Cambios metabólicos. Mutaciones puntuales. Alteraciones submicroscópicas.

La digoxigenina se utiliza como: Nucleasa. Tampón. Enzima. Marcador no radiactivo.