CRECIMIENTO MICROBIANO

El CRECIMIENTO BACTERIANO se refiere a un aumento de cantidad de bacterias, NO a un aumento de tamaño de las células individuales. Es la división de una bacteria en dos células hijas en un proceso llamado FISION BINARIA Suponiendo que no se produzca ningún caso de mutación las células hijas resultantes serán genéticamente idénticas a la célula original. VERDADERO. FALSO.

Parámetros del crecimiento microbiano: TIEMPO DE GENERACION. -Es el tiempo necesario para que una población BACTERIANA se divida. (fision binaria) -El tiempo de generación varía según el tipo de microorganismo, las condiciones AMBIENTALES y la TEMPERATURA. -A mayor tiempo de generación, más lento crece la población. -El numero elevado indica el numero de duplicaciones que se generan. -La mayoría de las bacterias tienen un tiempo de generación de 1 a 3 hs, para que un recuento sea significativo macroscópicamente se necesitan al menos 16 hs de incubación.

Parámetros del crecimiento microbiano: CURVA DE CRECIMIENTO POBLACIONAL. Cuando se inoculan las bacterias en un caldo de cultivo, se puede contar la población en distintos lapsos de tiempo, generando una curva de crecimiento en función del tiempo. Dentro de estas hay 4 etapas de crecimiento. FASE DE LATENCIA: -Número de bacterias prácticamente no se modifica, debido a que las células no se reproducen de inmediato en un medio nuevo. -Este periodo de adaptación puede durar 1 hora o más, dependiendo del microorganismo y del acostumbramiento al medio. -Durante este periodo las células NO están inactivas, sino que atraviesan un periodo de actividad metabólica muy importante. -Esta fase de latencia puede evitarse si se sub cultiva a la bacteria en el mismo medio al cual ya esta adaptada. FASE EXPONENCIAL: -Comienza la división y el periodo de crecimiento exponencial, La reproducción celular alcanza su máxima actividad durante esta etapa, y posee un nivel de crecimiento CONSTANTE. -En esta etapa las bacterias son mas SENSIBLES a las radiaciones y a los fármacos, la duración de esta etapa esta limitada a la disponibilidad de nutrientes en el medio. FASE ESTACIONARIA: -Se produce una curva horizontal, el crecimiento comienza a disminuir y el numero de muerte microbiana compensa al de crecimiento, estabilizando la curva, la actividad microbiana se torna mas lenta, esto se debe a que comienzan a escasear los nutrientes se acumulan desechos tóxicos. -En esta etapa las bacterias pueden forman ENDOSPORAS. FASE DE MUERTE: -Se produce un decaimiento de manera logarítmica con respecto al crecimiento. -Esta fase continua hasta que queda una pequeña fracción de células vivas, o todas mueren. -Esto se debe a la carencia de nutrientes y al aumento de desechos toxicos.

NOMBRE LAS ETAPAS DE LA CURVA DE PROLIFERACION BACTERIANA. A-Fase Exponencial. B-Fase de Latencia. C-Fase de Muerte D-Fase Estacionaria. A-Fase de Latencia. B-Fase Exponencial. C-Fase Estacionaria. D-Fase de Muerte. A-Fase Estacionaria. B-Fase de Latencia. C-Fase Exponencial. D-Fase de Muerte. A-Fase de Latencia. B-Fase Estacionaria. C-Fase de Muerte D-Fase Exponencial.

CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO. FASE LATENCIA. FASE EXPONENCIAL. FASE ESTACIONARIA. FASE DE MUERTE.

En cual o cuales de las etapas de crecimiento poblacional microbiano HAY DIVISION celular. FASE DE LATENCIA. FASE EXPONENCIAL. FASE ESTACIONARIA. FASE DE MUERTE.

EN LA FASE DE LATENCIA NO HAY FISION BINARIA , solo sintetiza Enzimas. VERDADERO. FALSO.

Para evitar la FASE DE LATENCIA del crecimiento microbiano, es necesario que el medio de cultivo tenga la misma composicion. VERDADERO. FALSO.

MEDICION DEL CRECIMIENTO MICROBIANO. Métodos Directos 1. Recuento de células totales en cámara de recuento 2. Recuento de células viables 3. Determinación de la masa celular. Métodos indirectos 4. Turbidimetría.

Se define como MEDIO DE CULTIVO a un material nutritivo preparado para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. VERDADERO. FALSO.

Como se denomina al microorganismo que se introduce en un MEDIO DE CULTIVO para su desarrollo?.

CRITERIO DE MEDIOS DE CULTIVOS. Debe contener nutrientes adecuados para el micororganismo que se desea desarrollar. Debe contener Humedad suficiente. Debe contener pH ajustado de manera apropiada. Debe contener una concentración conveniente de O2, tal vez ausente por completo. El medio en que se va a sembrar debe ser estéril. El medio de cultivo sembrado debe incubarse a la temperatura correcta.

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO ------- 1- TEMPERATURA. A mayor temperatura aumenta la velocidad de las reacciones quimicas. Calor excesivo desnaturaliza las proteinas y los acidos nucleicos. La TEMPERATURA MINIMA de crecimiento es la temperatura mas baja a la cual crecera la especie. La TEMPERATURA OPTIMA de crecimiento es la temperatura a la cual la especie crece mejor. La TEMPERATURA MAXIMA de crecimiento es la temperatura mas elevada a la cual es posible el crecimiento.

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO ------- 2- DISPONIBILIDAD DEL AGUA. La perdida osmotica de agua causa PLASMOLISIS, o reduccion del citoplasma de la celula. El crecimiento de la celula cuando la membrana plasmatica se separa de la pared celular. Por el aumento del citoplasma se puede producir una LISIS OSMOTICA de la celula. HALOFILOS requieren alta concentracion ClNa. HALOFILOS EXTREMOS Requien mayores concentracion de ClNa. HALOTOLERANTES Soportan cierta reduccion en la activida del H2O. OSMOTOLERANTES Pueden crecer en amplio rango de activida del H2O y Concentracion osmotica.

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO ------- 3 - pH. Las mayorías de las bacterias crecen mejor en un rango de pH de 6.5 - 7.5. Muy pocas bacterias crecen en un pH ACIDO. La ALCANILIDAD también inhibe el crecimiento microbiano, pero rara vez se utiliza para conservar alimentos. ACIDOFILOS ( 0-5.5) contenido gastrico. Aguas termales Acidas. NEUTROFILOS (5.5-8) Saliva, Leche y Sangre. ALCALOFILOS (8.5-11.5) Jabón, Lagos Alcalinos, Amoniaco.

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO ------- 4 - O2. Para algunas bacterias ( ANAEROBIOS OBLIGADOS) el O2 es letal. Forma toxica de O2 como radicales libres y superoxidos. Forma toxica de O2 como H2O2. Forma toxica de O2 como radical Hidroxilo. Estas formas toxicas producen oxidaciones en cadena que destruyen a la celula.

CLASIFICACION DE MICROORGANISMOS SEGUN TEMPERATURA. PSICROFILAS. MESOFILAS. TERMOFILAS. HIPERTERMOFILAS.

CONTROL DE CRECIMIENTO MICROBIANO. SOBRE OBJETOS Y MATERIALES INERTES. SOBRE TEJIDOS VIVOS.

CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO Es REDUCCION de la carga microbiana potencialmente patógena. Esto tiene como función prevenir la transmisión de estos agentes, prevenir la contaminación microbiológica de aguas, alimentos, medios de cultivo y otros productos. VERDADERO. FALSO.

DESINFECCION. DESINFECTANTES MAS COMUNES. ANTISEPTICOS MAS COMUNES.

UN DESINFECTANTE IDEAL debe cumplir con lo siguiente: • Amplio Espectro y efectivo • Elevada potencia microbicida. • Acción rápida y sostenida • Que no se inactive frente a materia orgánica. • Estable en la concentración de uso • Compatible con los materiales/superficies a ser aplicado. • No tóxico ni alergénico • Inodoro o de olor no molesto (agradable). • Con efecto residual (dependiendo su uso) • Buena relación costo/efectividad. • Fácil de usar • Amigable con el medio ambiente. • No debe generar resistencia.

CLASIFICANCION DE LOS DESINFECTANTES. NIVEL ALTO. NIVEL INTERMEDIO. NIVEL BAJO.

UN ESTERILIZANTE IDEAL debe cumplir con lo siguiente: • Gran eficacia germicida, costo razonable. • Rápido. • Gran capacidad de difusión. • Ausencia de toxicidad. • Ausencia de residuos. • Actúa en presencia de materia orgánica.

PROCESOS DE ESTERILIZACION Y DESINFECCION. METODOS FISICOS. METODOS FISICO-QUIMICOS. METODOS QUIMICOS. DESINFECTANTES.

OXIDO DE ETILENO: -Es un gas tóxico, completamente soluble en agua -Su inhalación puede producir edema de pulmón e irritación de mucosas. -Es considerado carcinogénico, mutagénico y teratogénico, además de ser explosivo e inflamable. -Método EN FRÍO más utilizado para la esterilización de materiales termolábiles, pero debe reducirse su uso a los casos en que pueda ser controlado muy estrictamente -Se utiliza puro o diluido con gases inertes. (Hidrocloro- fluoro-carbono). NO SE PUEDE UTILIZAR PARA ESTERILIZAR LÍQUIDOS. • Los textiles NO SE DEBEN ESTERILIZAR POR ESTE AGENTE. Se incluyen: • Gasas: debido a que retienen en su trama suficiente humedad que reacciona con el óxido de etileno, formando etilenglicol, residuo difícil de disolver. Agente microbicida de amplio espectro, porque puede penetrar fácilmente en el microorganismo, debido a que se trata de un éter cíclico que no posee carga eléctrica y tiene una masa molecular pequeña Los factores a tener en cuenta para controlar el proceso de esterilización son: • HUMEDAD RELATIVA (Por encima al 70%) • LA TEMPERATURA (55ºc) • EL TIEMPO (40 min) • SU CONCENTRACIÓN. (entre 400 y 800 mg/l). Condición indispensable: -El óxido de etileno llegué a todos y cada uno de los materiales a esterilizar, lo que se puede lograr solamente extrayendo previamente el aire. -El óxido de etileno es mucho más pesado que el aire y tiende a concentrarse en la base de los aparatos, si hay aire presente. ¿Cómo son los ciclos? 1. Vacío para eliminar el aire de la cámara y el que pueda estar ocluido en los materiales 2. Período para estabilizar la presión 3. Ingreso del gas 4. Vacío o barrido, una vez finalizada la difusión del gas. 5. Aireación con pulsos de aire. MATERIALES QUE SE PUEDEN ESTERILIZAR • INSTRUMENTAL OPTICO (broncoscopios, laringoscopios) • INSTRUMENTAL DELICADO(de neurocirugía u oftalmología) • MATERIAL TERMOSENSIBLE. -Es un AGENTE ALQUILANTE que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.

ESTERILIZACIÓN POR INMERSIÓN EN ÁCIDO PERACETICO. • Este ácido es el resultante de una mezcla determinada de ácido acético, con peróxido de Hidrogeno y agua. • Es esporicida al 0,3%, con gran capacidad de solubilización en agua, pero con mayor solubilidad a los lípidos y sin riesgos de inactivación por catalasa o peroxidasas. • El problema que presenta es su poder de corrosión sobre los metales, dado su carácter oxidante. • Actualmente se le incorpora un agente anticorrosivo y neutralizador. La función de estos últimos es actuar como tampón en la solución del ácido PERACETICO, llevando el pH hasta 6,4, protegiendo así de la corrosión a los materiales que serán esterilizados. • Su mecanismo de acción es un proceso oxidativo de los componentes de la pared celular. La temperatura de trabajo es de 50°C a 56°C. • El tiempo de esterilización es de 30 minutos. • La desventaja es que sólo es posible esterilizar por este sistema elementos SUMERGIBLES en su totalidad.

ESTERILIZACIÓN POR PLASMA DE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO. El plasma gaseoso de define como una nube de partículas con cargas + y -, junto con átomos y moléculas. Este estado de la materia (el 4°) puede ser producido a través de campos eléctricos o magnéticos. Agente esterilizante: -Una solución acuosa de H2O2 al 58% es vaporizador en el interior de una cámara hermética. -Por medio de inducción de radiofrecuencia, se generan campos eléctricos que provocan la aceleración de electrones y otras partículas, que colisionan unas con otras, generándose el plasma. Estos choques inician reacciones que producen radicales libres: hidroxilos, hidroperoxidrilos, peróxido activado, luz U.V., • Estos radicales libres y otras especies químicas presentes en la nube de plasma, interactúan con la membrana celular, las enzimas y ácidos NUCLEICOS, provocando la muerte del microorganismo. • El plasma descompone el H2O2 en una " nube" de especies muy excitadas que se recombinan, convirtiendo al H2O2 en agua y O2. La molécula de H2O2 en estado de excitación tiene un electrón elevado a un nivel más alto de energía. • Cuando la molécula cae nuevamente al estado estable, emite radiación visible y/o U.V. • El sistema de esterilización por plasma de H2O2 es incompatible con la presencia de celulosa y todos sus derivados. • Los únicos embalajes aptos son los de polipropileno no tejido. • No se pueden usar apósitos o gasas, porque contienen celulosa. • El tiempo del ciclo estándar es de aproximadamente 28 minutos. Entre las ventajas del sistema: • no deja residuos tóxicos. • No hay necesidad de Aireación y es compatible con la mayoría de los materiales de manejo hospitalario. Como desventajas • el sistema no es compatible con la celulosa, los polvos y los líquidos.

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO. Por vapor saturado a presión es EL MÉTODO MÁS SEGURO Y UTILIZADO. Se define la esterilización por vapor como el empleo de vapor saturado a presión durante, por lo menos 15 minutos, a una temperatura de 121°C en un recipiente de presión regulada. ESTO ES EL AUTOCLAVE. • Destruye a los microorganismos por la desnaturalización proteica • Gran uso para medios de cultivo, instrumentos, soluciones, etc. • El ciclo comienza con el ingreso de vapor de agua a la cámara. El aire, que es más pesado, desciende al fondo de la cámara y sale de la misma, mientras ingresa el vapor a lo alto de la cámara. • Si el vapor no llega a todo el material, el método resulta inútil. • Es muy importante eliminar todo el aire de los esterilizadores a medida que se introduce el vapor; porque las mezclas de aire y vapor retardan el calentamiento en la cámara y producen temperaturas finales más bajas, por lo tanto, existirán zonas no " estériles". Desventajas del método: • No se puede usar para elementos metálicos cromados o niquelado. • No esteriliza polvos. • No esteriliza sustancias grasosas u oleosas (parafina, vaselina) • No esteriliza sustancias de plásticos sensibles. Ciclos • 121°C con vapor de agua saturado durante 15 a 20 minutos. • 134°C con vapor de agua saturado por 3 o 4 minutos.

ESTERILIZACION POR CALOR SECO. Estufa de esterilización: No hay corrosión de objetos metálicos, se suele utilizar 170°C, entre 1-3 horas A este tiempo hay que sumarle el de precalentamiento, que se supone necesario para que todo el material llegué a la temperatura de esterilización. Es un proceso más lento, produce oxidación de los constituyentes celulares y desnaturalización proteica. Algunos materiales no soportan la esterilización por vapor: • Vaselina • Aceites • Minerales • grasas, ceras, talcos • metales niquelado, esmaltados, cromados. Se debe cargar la ESTUFA DE ESTERILIZACION de forma tal que: • No impida la circulación del aire. • Los materiales no toquen las paredes, piso y techo de estufa, ni se toquen entre sí. • La carga no supere el 80% de la capacidad total de la cámara. Recordar que: • NO se puede ni debe esterilizar material textil por calor seco, porque no es conductor del calor. • El material debe ser retirado frío de la estufa. • NO se deben esterilizar por estufa gomas, plásticos o agua.

FILTRACION: Se da por el pasaje de una solución o un gas a través de un material similar al de un filtro, con poros lo suficientemente pequeños para retener los microorganismos, se utiliza para esterilizar materiales termolábiles como medios de enzimas, vacunas, y sobre todo antibióticos. VERDADERO. FALSO.

Los AGENTES ALQUILANTES : Rompe la union glucosilica. Radiacion Gama y Uv. Se insertan entre 2 pares de bases y las separan. Forman dimeros de timina. Transfieren grupos alquilo a las bases.

Por cual de los siguientes metodos se puede esterilizar material TERMOSENSIBLE. Autoclabe y Radiacion Gamma. Ebullicion y Filtracion. Horno Pasteur y Autoclave. Radiacion gamma y Uv. Ebullicion y Radiaion Uv.

AGENTES ESTERILIZANTES - AGENTES FISICOS. CALOR HUMEDO -EBULLICION. CALOR HUMEDO- AUTOCLAVE. CALOR HUMEDO- PASTEURIZACION. CALOR SECO - ESTUFA. CALOR SECO - FLAMEADO. CALOR SECO - INCINERACION. FRIO-CONGELACION. MECANICA-FILTRACION. MECANICA-RADIACION UV. MECANICA-RADIACION IONIZANTE.

AGENTES ESTERILIZANTES - AGENTES QUIMICOS. FENOLICOS. ALCOHOLES. HALOGENOS. ALDEHIDOS. GAS ESTERILIZANTE - OXIDO DE ETILENO. GAS ESTERILIZANTE - PEROXIDO DE HIDROGENO (H2O2). DETERGENTE. NH4 CUATERNARIO.

Señalar la UNICA respuesta correcta - Para esterilizar talco emplearia : ESTUFA u HORNO PASTEUR a 180°C 1hora. ESTUFA u HORNO PASTEUR a 160°C 1hora. AUTOCLAVE en ciclo de 121°C 15 minutos 1Atm. AUTOCLAVE en ciclo de 134°C 3 minutos 2Atm. RADIACION GAMMA.

Señalar la UNICA respuesta correcta - Cual de los siguientes metodos tiene mas probabilidades de ser bactericida. LIOFILIZACION (congelación, desecación). CONGELACION INTENSA. RADIACION IONIZANTE. FILTRACION POR MEMBRANA. TODAS SON EFECTIVAS.

Cual de los siguientes metodos NO destruye a las ENDOSPORAS. INCINERACION. CALOR SECO. CALOR HUMEDO. PATEURIZACION. TODAS SON EFECTIVAS.

Cual o cuales de los siguientes metodos es el mejor para esterilizar una solucion termolabil. INCINERACION. CALOR SECO. CALOR HUMEDO. PATEURIZACION. FILTRACION. TODAS SON EFECTIVAS.

A diferencia del glutaraldehido, el OPA. No requiere inactivación. Requiere un tipo de inmersión del material prolongado. No es activo frente a endosporas. Actúa a pH ácido. Ninguna respuesta es correcta.

Los materiales críticos requieren: Desinfección de nivel intermedio. Esterilización. Sanitización. Desinfección de alto nivel.

Cuando se emplean soluciones de hipoclorito de sodio, la actividad antimicrobiana se atribuye a: Su grado de disociación electrolítica. Al catión Na+. La molécula no disociada de ácido hipoclorito. Al pH alcalino de las soluciones. Ninguna opción es correcta.

Los ANAEROBIOS TOLERANTES se caracterizan por: Presentar respiración aerobia. Presentar respiración anaerobia. Vivir en anaerobiosis estricta. Carecer de catalasa. Ninguna respuesta es correcta.

Los VASELINA debe esterilizarse por: Radiacion gamma. Radiacion uV. Calor seco. Calor humedo a alta presion. Ninguna respuesta es correcta.

Cuando el mecanismo de accion antiseptica de la POVIDONA IODADA. Alquilacion de proteinas. Por oxidacion. Hidrolisis de la proteinas bacterianas. Halogenacion de las bases puricas. Ninguna respuesta es correcta.

Cuales de los siguientes agentes quimicos se pueden utilizar como antiseptico. Iodo povidona y formol. Clorhexidina y alcohol 70°. Oxido Etileno y Alcohol 70°. Fenol y Clorhexidina. Hipoclorito de Sodio y Hexaclorofeno.

En relacion a los desinfectantes Halogenos, NO es correcto: Acido hipocloroso, la forma mas activa del Cloro no puede difundir a través de la pared celular por su gran tamaño. El iodo es capaz de combinarse con la tirosina, un amino acido. El iodo se usa para desinfección de piel y heridas. Al añadir cloro al h20 se forma acido hipocloroso. El cloro y el iodo puede usarse solos o en solución.

A diferencia del glutaraldehido, el OPA. No es activo frente a endosporas. No requiere inactivación. Ninguna respuesta es correcta. Requiere un tipo de inmersión del material prolongado. Actúa a pH ácido.

Todas las afirmaciones siguientes sobra el AGAR puro son verdaderas, excepto una. No es activo frente a endosporas. No requiere inactivación. Ninguna respuesta es correcta. Requiere un tipo de inmersión del material prolongado. Actúa a pH ácido.

El agar o agar-agar es una sustancia carragenina, un polisacárido sin ramificaciones obtenido de la pared celular de varias especies de algas de los géneros Gelidium, Eucheuma y Gracilaria. VERDADERO. FALSO.

Un ejemplo de DESINFECTANTE de BAJO NIVEL es: Hipoclorito de sodio. Fenol. Etanol al 70%. Cloruro de benzalconio. Ácido peracético.

El contacto del HIPOCLORITO con el FORMOL es peligroso porque: Se forma un compuesto alergénico. Se forma paraldehído. Ninguno es correcto. Se forma un compuesto explosivo. Se forma éter clorometilmetílico.

Un medio que permite el crecimiento de cierto tipo de microrganismos e inhibe el de otros se denomina.