Pc 3º: Extracción y Purificación de ADN y cfADN

¿Quién realizó el primer extracto crudo de ADN y en qué año?. Friedrich Miescher en 1869. Gregor Mendel en 1900. James Watson y Francis Crick en 1953. Rosalind Franklin en 1952. Friedrich Miescher en 1900.

¿Qué científico describió por primera vez la adsorción de ácidos nucleicos a superficies de vidrio o sílice en presencia de altas concentraciones de sales caotrópicas?. Volgestein y Gillespie en 1979. Miescher y Watson en 1869. Franklin y Crick en 1952. Gillespie y Volgestein en 1950. Chargaff y Wilkins en 1960.

¿Cuál de los siguientes NO es un criterio de selección de protocolo para la extracción de ácidos nucleicos?. Tipo de ácido nucleico. Grado de pureza requerido. Costo del protocolo. Número de páginas del manual de instrucciones. Muestra biológica a partir de la que se hará la extracción.

¿Qué tipo de muestra biológica se utiliza comúnmente para establecer la presencia de mutaciones en línea germinal asociadas a enfermedades genéticas como la Fibrosis Quística?. Sangre periférica. Orina. Heces. Saliva. Pelo.

¿Qué tipo de muestra biológica se utilizaría para detectar un reordenamiento génico como el gen de fusión BCR-ABL en un paciente con leucemia?. Sangre periférica. Hisopado nasofaríngeo. Líquido cefalorraquídeo. Orina. Muestra de tejido tumoral.

¿Para qué tipo de diagnóstico se utiliza un hisopado nasofaríngeo o orofaríngeo?. Detección de patógenos (virus, bacterias, hongos). Análisis de ADN genómico para enfermedades hereditarias. Determinación de perfil genético en escenas de crímenes. Detección de mutaciones en cáncer. Análisis de cfDNA.

¿Qué material biológico se utiliza para detectar Mycobacterium tuberculosis en casos de tuberculosis extrapulmonar?. Líquido Cefalorraquídeo (LCR) y orina. Sangre periférica y saliva. Heces y esputo. Pelo y uñas. Biopsia de tejido tumoral.

¿Cuál de las siguientes muestras NO se considera típicamente para determinar un perfil genético en la escena de un crimen?. Manchas de sangre. Cabello con raíz. Semen. Uñas. Excremento de mascotas.

Las 'mutaciones drivers' en cáncer de pulmón, como las de los genes EGFR, KRAS y BRAF, se pueden detectar en: Biopsia de tejido tumoral y biopsia líquida. Solo en biopsia de tejido tumoral. Solo en biopsia líquida. Sangre periférica no tumoral. Orina.

¿Qué es el 'circuloma tumoral' en el contexto de las biopsias líquidas?. Material circulante derivado del tumor o componentes tumorales circulantes. Solo células tumorales circulantes (CTCs). Solo ADN tumoral circulante (ctDNA). Solo exosomas tumorales. Proteínas séricas no relacionadas con el tumor.

¿Cuál de las siguientes NO es una aplicación de las biopsias líquidas en oncología?. Diagnóstico temprano de cáncer. Monitoreo de la respuesta al tratamiento. Detección de metástasis ocultas. Reemplazo completo de biopsias de tejido en todos los casos. Identificación de biomarcadores de resistencia a fármacos.

El ADN tumoral circulante (ctDNA) se origina de: Células neoplásicas. Células sanas del tejido circundante. Glóbulos blancos no malignos. Plasma libre de células. Células epiteliales normales.

¿Qué tecnología se utiliza comúnmente para analizar el ctDNA en plataformas de diagnóstico?. PCR en tiempo real, PCR digital, Next Generation Sequencing (NGS). Electroforesis en gel. Microscopía electrónica. Espectrofotometría. Western blot.

¿Cuál es una ventaja de la biopsia líquida sobre la biopsia de tejido convencional?. Menos invasiva. Mayor sensibilidad en todos los casos. Proporciona evaluación histológica. Requiere penetración de órganos. No requiere monitoreo continuo.

¿Qué tipo de analitos se pueden examinar en una biopsia líquida según la figura?. ctDNA, CTCs, Exosomas, Proteínas tumorales. Solo ctDNA. Solo CTCs. Solo Exosomas. ARN mensajero de células sanas.

¿Qué paso inicial se realiza en la mayoría de los protocolos de purificación de ADN?. Lisis celular. Precipitación del ADN. Elución del ADN. Lavado de la muestra. Centrifugación.

¿Cuál de los siguientes reactivos se utiliza comúnmente en el paso de lisis celular?. Detergentes (SDS, Tritón X-100). Etanol. Isopropanol. Buffer TE. Agua destilada.

¿Qué enzima se utiliza principalmente en el paso de desproteinización durante la extracción de ADN?. Proteinasa K. RNasa. DNasa. Lipasa. Amilasa.

¿Qué alcohol se utiliza comúnmente para la precipitación del ADN?. Etanol. Metanol. Isopropanol. Tanto Etanol como Isopropanol. Glicerol.

¿Cuál de los siguientes es un desafío principal durante la extracción de ácidos nucleicos?. Contaminantes químicos. Estabilidad del equipo. Disponibilidad de reactivos básicos. Costo de las pipetas. Errores de transcripción.

¿Qué método de extracción de ADN utiliza principalmente una matriz de sílice para atrapar el ADN?. Kits comerciales basados en columnas de sílice. Extracción orgánica Fenol-Cloroformo. CHELEX. Lisis por calor. Beads magnéticos.

¿Cuál es una desventaja de los métodos de extracción de ADN basados en sílice?. Costo elevado. Bajo rendimiento de ADN. Alta toxicidad de los reactivos. Lentitud del proceso. Dificultad para manejar múltiples muestras.

¿Cómo se previene la degradación del ADN causada por DNAsas?. Limpieza adecuada del ambiente de trabajo y uso de guantes. Almacenamiento prolongado a temperatura ambiente. Uso de reactivos sin control de calidad. Manipulación frecuente de la muestra sin precauciones. Incubación a altas temperaturas.

¿Cuál es una medida para evitar la contaminación del ADN durante la extracción?. Inclusión de un control de extracción. Mezclar todas las muestras en un solo tubo. Reutilizar reactivos sin verificar su pureza. Trabajar en un área abierta sin flujo de aire controlado. No utilizar tips con filtro.

¿Qué característica debe tener un método eficaz de extracción de ADN?. No introducir inhibidores y/o contaminantes. Ser susceptible a la degradación. Limitar el uso a un solo tipo de muestra. Requerir reactivos altamente tóxicos. Ser un proceso lento y laborioso.

¿Para qué se utiliza el paso de 'Cell Lysis' en la preparación de ADN?. Romper las membranas celulares para liberar el ADN. Eliminar las proteínas. Precipitar el ADN del sobrenadante. Concentrar el ADN. Eluir el ADN de la columna.

¿Qué buffer se utiliza comúnmente para la resuspensión o elución del ADN purificado?. Buffer TE. Buffer de lisis. Buffer de lavado. Solución salina. Agua de la llave.

En el procedimiento del Kit High Pure PCR template, ¿cuál es el propósito de centrifugar la mezcla después de añadir isopropanol y transferirla a la columna de sílice?. Permitir la unión del ADN a la columna de sílice. Eliminar el ADN de la muestra. Lisar las células. Precipitar las proteínas. Eluir el ADN de la columna.

En el procedimiento de aislamiento de cfDNA, ¿qué se transfiere al tubo cónico de 15 mL?. 2 mL de plasma. 2 mL de sangre total. 2 mL de suero. 2 mL de LCR. 2 mL de saliva.

¿Cuál es la temperatura de incubación recomendada para el lisado en el procedimiento de aislamiento de cfDNA?. Entre 15 y 30 °C. 70 °C. 4 °C. Congelación a -20 °C. Temperatura ambiente sin especificar.