Técnicas de Radiofarmacia (TSID) - Tema 3

Señala la respuesta CORRECTA: El RIA emplea anticuerpos de afinidad baja. Los anticuerpos se encuentran en el suero sanguíneo y otros líquidos orgánicos. Las muestras biológicas solo se conservan bien a temperatura ambiente durante 5 horas. El RIA es una técnica que se realiza in vivo.

Señala la respuesta CORRECTA: El RIA competitivo se basa en una cantidad conocida de sustancia. Las inmunoglobulinas (Ig) están compuestas por ocho cadenas polipeptídicas. Los anticuerpos no pueden actuar como antígenos porque son proteínas capaces de activar la respuesta inmunitaria. El RIA es una técnica que se realiza in vitro.

Señala la respuesta CORRECTA: En la técnica del RIA, en ausencia de antígeno frío, todos los complejos Ag-Ac serán radiactivos. La técnica del radioinmunoanálisis permite determinar concentraciones elevadas de una sustancia. Un antígeno (Ag) es una proteína producida por el sistema inmunitario del cuerpo cuando detecta sustancias dañinas. Un anticuerpo (Ac) es una sustancia que, al introducirse en el organismo, induce en este una respuesta inmunitaria, provocando la formación de antígenos.

Un anticuerpo: Es una proteína producida por el sistema inmunitario del cuerpo. Se genera en el organismo cuando este detecta una sustancia dañina o antígeno. Puede ser producido frente a un antígeno, o bien por cultivos celulares clónicos. Todas las respuestas son correctas.

Porción de una macromolécula que es reconocida por el sistema inmunitario, (específicamente la secuencia a la que se unen los anticuerpos). Alícuota. Muestra. Epítopo. Ligando.

En referencia a la extracción de muestras, resulta fundamental: La recepción, la manipulación, el procesamiento y la conservación. La experiencia del técnico para evitar la contaminación. Su recogida y transporte. El almacenamiento una vez extraída la muestra.

Señala la respuesta CORRECTA: Si el laboratorio está dentro del centro sanitario donde se extrae la muestra, pero en otra sección, las muestras son transportadas al laboratorio mediante un sistema de tubos neumáticos o en mano. Si el laboratorio está dentro del centro sanitario donde se extrae la muestra, el transporte se realizará mediante el empleo de cajas transportadoras, con o sin refrigeración, según la naturaleza de la muestra. Según indica la ley, el laboratorio donde se realizan las muestras debe de estar dentro del centro de extracción o recogida de las mismas. Para evitar su contaminación, las muestras nunca pueden ser transportadas en mano desde la sala de extracción hasta el laboratorio.

Parte que se toma de un volumen o de una masa inicial para ser usada en una prueba de laboratorio, cuyas propiedades físicas y químicas y su composición representan las de la sustancia original. Alícuota. Muestra. Epítopo. Fracción.

Clasificación de muestras según su tipo de procesado, que, a su vez, depende de su empleo (sangre total, suero, plasma, etc.). Precentrifugación. Muestreo. Centrifugado. Catalogado.

Sustancia (normalmente una molécula pequeña) que forma un complejo con una biomolécula y emite una señal al unirse al centro activo de una proteína. Alícuota. Muestra. Epítopo. Ligando.

Las muestras se conservan bien a temperatura ambiente, sin que sufran alteraciones importantes: Durante una hora. Aproximadamente 30 minutos. Hasta 24 horas. Nunca deben de permanecer a temperatura ambiente.

Pasados sesenta minutos desde su extracción, las muestras o las fracciones alícuotas de las muestras deben mantenerse refrigeradas a una temperatura: Entre 4 y 6 grados centígrados. Ambiente. De 15 grados centígrados. Entre 10 y 12 grados centígrados.

Señala la respuesta CORRECTA: La sangre que se vaya a usar para preparar suero o plasma no debe refrigerarse. Las muestras de orina pueden sufrir descomposición microbiológica y alteraciones químicas, por lo que no deben de refrigerarse nunca. Cuando se quiera conservar suero o plasma a largo plazo, se puede refrigerar a 10 grados centígrados. Las heces deben de conservarse a temperatura ambiente.

Los procedimientos inmunológicos más útiles y más frecuentemente empleados en la medicina actual son: Aquellos que se basan en la especificidad de la unión antígeno-anticuerpo (Ag-Ac). Aquellos que se basan en los diferentes tipos de reacción de los anticuerpos. Aquellos que se basan en los diferentes tipos de reacción que provocan los antígenos. Aquellos que se basan en el efecto de la respuesta inmunitaria.

El radioinmunoanálisis (RIA): Usa isótopos radiactivos. Es una técnica in vitro. Se fundamenta en una reacción antígeno-anticuerpo. Todas las respuestas son correctas.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre los fundamentos del radioinmunoanálisis (RIA): Se mezcla una cantidad constante de antígeno marcado radiactivamente y una cantidad constante de un anticuerpo para ese antígeno. Se produce una reacción entre antígeno (Ag) y anticuerpo (Ac). El antígeno frío (no marcado) competirá con el marcado para unirse al anticuerpo. El aumento en la medida de la radiactividad es proporcional a la concentración de antígeno frío en la muestra.

Tras realizar la técnica de radioinmunoanálisis (RIA), se observa una ausencia de antígeno frío: Todos los complejos Ag-Ac serán radiactivos por lo que la radiactividad medida es máxima. Ninguno de los complejos Ag-Ac serán radiactivos por lo que la radiactividad medida será máxima. Todos los complejos Ag-Ac serán radiactivos por lo que la radiactividad medida será mínima. Ninguno de los complejos Ag-Ac serán radiactivos por lo que la radiactividad medida será mínima.

Indica qué categoría/categorías de RIA existen: Competitivo. No competitivo. Secuencial y de desplazamiento. Todas las respuestas son correctas.

El RIA competitivo: Tiene como fin el detectar la sustancia antigénica (ligando nativo) presente en la muestra. Se basa en una cantidad desconocida de sustancia, denominada ligando nativo (L). Se divide en RIA secuencial y de desplazamiento. Todas las respuestas son correctas.

El RIA competitivo: Tiene como fin el detectar la sustancia antigénica (ligando nativo) presente en la muestra. Se basa en una cantidad desconocida de sustancia, denominada ligando nativo (L). Incorpora una cantidad conocida de la sustancia antigénica a detectar en la muestra pero marcada con un radioisótopo o ligando marcado (L*). Todas las respuestas son correctas.

El RIA competitivo: Se divide en RIA secuencial y de desplazamiento. Utiliza un ligando nativo (L) y un ligando marcado (L*). Utiliza antígenos radiactivos que compiten con los antígenos no radiactivos presentes en la muestra por una limitada cantidad de anticuerpos específicos (Ac). Todas las respuestas son correctas.

El RIA secuencial: Es una modalidad de RIA competitivo. Se realiza en dos pasos. Incuba primero el ligando nativo (L) con el anticuerpo (Ac) en exceso, y después el ligando marcado (L*). Todas las respuestas son correctas.

El RIA de desplazamiento: Es una modalidad de RIA competitivo. Incuba el ligando marcado (L*) con el anticuerpo (Ac) y, posteriormente, se añade el ligando nativo (L). El ligando nativo desplaza al ligando marcado del complejo. Todas las respuestas son correctas.

Señala la respuesta CORRECTA: En el RIA no competitivo, el ligando nativo (L) reacciona con dos anticuerpos (Ac1 y Ac2*). El RIA no competitivo se divide en RIA secuencial y RIA de desplazamiento. En el RIA no competitivo se utiliza el ligando nativo (L) y el ligando marcado (L*). Todas las respuestas son correctas.

En el análisis inmunorradiométrico (IRMA): La proteína de enlace es un anticuerpo marcado (Ac*). El anticuerpo marcado (Ac*) se añade en exceso. Se distinguen dos modalidades: el IRMA no competitivo o de inhibición y el IRMA competitivo o tipo sándwich. Todas las respuestas son correctas.

En el análisis inmunorradiométrico (IRMA) tipo sándwich: Se inmoviliza una concentración fija del Ac1 (no marcado) en un soporte sólido. La muestra problema o de calibrado se añade antes que el Ac*2 marcado. Tras la incubación, se elimina el Ac*2 marcado, no unido. Todas las respuestas son correctas.

En el IRMA competitivo o de inhibición: El Ag está fijado al tubo de reacción y al añadir tanto la muestra como el Ac* se produce la competición entre los antígenos por el anticuerpo marcado. Se forman dos tipos de complejos: el Ac*-Ag del tubo, y el Ac-Ag de la muestra. Tras el lavado, la actividad del complejo en fase sólida es inversamente proporcional a la cantidad de ligando nativo de la muestra. Todas las respuestas son correctas.

En el IRMA no competitivo o tipo sándwich: Se dispone de un anticuerpo unido en fase sólida (Ac1) al que se le añade el Ag de la muestra y un segundo anticuerpo marcado (Ac2*). Se formarán tantos complejos Ac1-Ag-Ac2* como sean posibles. La actividad presente en el tubo tras el lavado será directamente proporcional a la cantidad de ligando nativo existente en la muestra. Todas las respuestas son correctas.

Indica la capacidad que tiene el estimador para detectar casos positivos, que serían los casos realmente enfermos (proporción de enfermos correctamente identificados). Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Caracteriza la capacidad de la prueba para detectar la enfermedad en sujetos enfermos. Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Indica la capacidad del estimador para detectar casos negativos, que serían los casos realmente sanos (proporción de sanos correctamente identificados). Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Caracteriza la capacidad de la prueba para detectar la ausencia de la enfermedad en sujetos sanos. Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Es el grado de concordancia entre diferentes medidas del analito obtenidas en pruebas analíticas realizadas en las mismas condiciones. Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Es el grado de concordancia del valor de concentración o cantidad obtenido por el analista y el valor del analito en la muestra biológica considerado como real. Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Esta magnitud describe la reproductibilidad de los resultados. Sensibilidad. Especificidad. Exactitud. Precisión.

Técnica muy usada en inmunología para medir anticuerpos, antígenos, proteínas y glicoproteínas en muestras biológicas. ELISA. RIA de competición. RIA no competitivo. IRMA.

Aplicaciones del ensayo de inmunoadsorción ligado a enzima (ELISA): Infecciones por VIH. Tests de embarazo. Medición de citocinas. Todas las respuestas son correctas.

Esta técnica se realiza generalmente en placas de 96 pocillos, lo que permite medir múltiples muestras en un único experimento. ELISA. IRMA. RIA. Todas las respuestas son correctas.

Indica cuál es una VENTAJA del RIA frente a la técnica ELISA: Es altamente sensible, lo cual permite detectar proteínas que se encuentran a muy bajas concentraciones en la muestra. Se caracteriza por su fácil implementación, versatilidad y alta sensibilidad y especificidad. Implica un menor exposición a los isótopos radiactivos. Todas las respuestas son correctas.

Indica cuál es un INCONVENIENTE de la técnica ELISA: La obtención de una señal débil, de baja intensidad o incluso inexistente. La generación de un alto ruido de fondo que distorsiona los resultados. La alta inconsistencia de los resultados entre pocillos. Todas las respuestas son correctas.

Indica cuál NO es una característica de los antígenos: Son endógenos. Son inmunológicos. Antigenicidad o especificidad antigénica. Se localizan en la superficie de un agente patógeno.

Moléculas de menor tamaño que por sí solas no pueden provocar una respuesta inmune, pero que asociadas a una molécula transportadora inmunogénica (o carrier) pueden reaccionar con los Ac formados. Haptenos. Alícuotas. Epítopo. Antígenos.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre los anticuerpos: Son glucoproteínas que se encuentran en la sangre, la linfa y las secreciones corporales. Pueden actuar como antígenos. Los forma el organismo como respuesta al contacto con un antígeno específico y reaccionan específicamente contra él. También se les conoce como inmunógenos y son las moléculas capaces de inducir una respuesta inmune.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre las inmunoglobulinas: Están compuestas por cuatro cadenas polipeptídicas. Se componen de una cadena pesada (cadena H) y tres cadenas ligeras (cadenas L). Sus cadenas tienen una región variable y una región constante. Son glucoproteínas.

Las fracciones libres que encontramos en el tubo de reacción tras la reacción Ag-Ac: Están constituidas por Ag frío y Ag marcado. Están formadas por complejos Ag-Ac y Ag marcado-Ac. Están formadas por complejos Ag marcado-Ac. Están formadas por complejos Ac marcado-Ag.

Las fracciones ligadas o unidas que encontramos en el tubo de reacción tras la reacción Ag-Ac: Están constituidas por Ag frío y Ag marcado. Están formadas por complejos Ag-Ac y Ag marcado-Ac. Están formadas por complejos Ag marcado-Ac. Están formadas por complejos Ac marcado-Ag.

Proceso mediante el cual las fases libres y ligadas son separadas tras haberse establecido la reacción entre el ligando nativo, el ligando marcado y el anticuerpo: Partición. Separación. Reconstitución. Fraccionamiento.

El método del doble anticuerpo y el método de la proteína A son ejemplos de: Métodos de adsorción del antígeno libre. Métodos de precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac. Métodos de precipitación específica del complejo Ag-Ac. Métodos de separación en fase sólida.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre los contadores de centelleo: Son dispositivos que constan de un cristal de centelleo, un tubo fotomultiplicador y circuitos electrónicos apropiados. El más usado es el cristal de yoduro sódico activado con talio. Su funcionamiento óptimo se evalúa según tres parámetros (eficacia del recuento, desviación estadística y actividad de fondo). No permite trabajar con diferentes isótopos al mismo tiempo.

La curva patrón relaciona: Los valores de radiactividad obtenidos con la concentración de sustancia analizada. La intensidad de los destellos de luz con el radioisótopo que la genera. La eficacia del recuento con la actividad de fondo. Las cuentas por minuto (cpm) con la radiactividad de la sustancia.

La curva patrón relaciona: Los valores de radiactividad obtenidos con la concentración de sustancia analizada. Las concentraciones obtenidas con las concentraciones estándares para ese radioisótopo. La eficacia del recuento con la actividad de fondo. Las cuentas por minuto (cpm) con la radiactividad de la sustancia.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre el cálculo de resultados de un ensayo: El ajuste de la curva patrón se puede realizar de forma manual o por ordenador. La forma de la curva depende de tres factores: concentración del Ac, concentración total del Ag* y la constante de afinidad del Ac. Se pueden obtener escalas lineales o logarítmicas o semilogarítmicas. La forma de la curva representa la radiactividad del anticuerpo frente a la variable tiempo.

Señala la respuesta INCORRECTA sobre el control de calidad: Puede ser interno o externo. Debe de medirse en términos tanto cuantitativos como cualitativos. Los controles de calidad internos se llevan a cabo diariamente y con otra periodicidad establecida por la dirección del centro asistencial. Determinadas instituciones sanitarias oficiales, nacionales e internacionales pueden actuar como centros reguladores de los controles de calidad internos.

Consiste en la adsorción del antígeno libre en la superficie porosa de distintas sustancias, separando posteriormente las fracciones mediante una centrifugación y decantación del sobrenadante. Métodos de adsorción del antígeno libre. Métodos de precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac. Métodos de precipitación específica del complejo Ag-Ac. Métodos de separación en fase sólida.

En estos métodos, el anticuerpo está adsorbido o ligado químicamente a una matriz sólida e insoluble. La separación física de las fracciones libre y ligada se hace mediante el lavado de los tubos, las bolitas o los discos. Métodos de adsorción del antígeno libre. Métodos de precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac. Métodos de precipitación específica del complejo Ag-Ac. Métodos de separación en fase sólida.

Indica en qué método NO se utiliza la centrifugación y decantación del sobrenadante para separar las fracciones libres y ligadas. Métodos de adsorción del antígeno libre. Métodos de precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac. Métodos de precipitación específica del complejo Ag-Ac. Métodos de separación en fase sólida.

En estos métodos, se utilizan concentraciones elevadas de sales inorgánicas que atrapan las moléculas de agua de la solución, insolubilizando el complejo Ag-Ac y precipitando. Métodos de adsorción del antígeno libre. Métodos de precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac. Métodos de precipitación específica del complejo Ag-Ac. Métodos de separación en fase sólida.