temas 11 y 14

¿Cuál es el mejor método para identificar el inicio de traducción de cualquier gen de un microorganismo? Seleccione una. determinar el inicio de transcripción. localizar el sitio de unión a ribosomas. cualquiera de los anteriores. secuenciar el extremo N-terminal de la proteína Degradación Edman. buscar las secuencias de -10 y de -35.

¿Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta?. En el sistema MutS sólo crecen las cepas con plásmidos mutantes. En el método MutS se destruye la cadena de DNA silvestre y se favorece la replicación del DNA mutante. En los métodos dut-ung el fagémido se obtiene de una cepa dut- ung-. Los métodos de mutagénesis USE usan tres primers mutagénicos.

A. La mutagénesis dirigida de genes es una técnica de ingeniería genética que se realiza in vivo, mediante el uso de un oligonucleótido complementario al DNA a mutar. B.Kary B. Mullis aprovechó la tecnología de la PCR, desarrollada por Michael Smith para el desarrollo de la mutagénesis dirigida, recibiendo ambos el Premio Nobel en 1993. Solo A verdadera. A y B falsas. Solo B verdadera. A y B verdaderas.

A. Para interrumpir el gen murC de E. coli deberemos clonar el extremo 5' de dicho gen junto con las secuencias reguladoras en un plásmido suicida. B. Para poner el gen murC bajo el control del promotor lac debemos clonar el extremo 5' de dicho gen aguas abajo del promotor lac en un plásmido suicida. A y B verdaderas. solo A verdadera. solo B verdadera. A y B falsas.

A. Un transposón arrastra entre las secuencias de inserción (IS) varios genes de resistencia a antibióticos. B. En el Tn5 uno de dichos genes es antiviral. Solo B verdadera. A y B falsas. Solo A verdadera. A y B verdaderas.

Pregunta de buscar o pensar. En la bibliografía sobre sistemas de secreción TAT se demuestra que no son necesarias dos argininas (RR) en el extremo terminal de la proteína SufI (sulfatasa extracelular) de Escherichia coli. ¿Qué aminoácido puede reemplazar a arginina?. Lisina. Triptófano. Fenilalanina. Treosina. Valina.

¿Cuál es el mejor método para identificar el promotor de cualquier gen de un microorgansimo?. determinar el inicio de traducción. buscar las secuencias de –10 y de -35. localizar el sitio de unión a ribosomas. cualquiera de los anteriores. determinar el inicio de transcripción.

Si al interrumpir el gen xyzA por doble recombinación, usando plásmidos suicidas conjugativos, solo obtenemos transconjugantes por recombinación simple debemos concluir que: El gen xyzA es esencial y se encuentra en copia única. El gen xyzA es esencial para la viabilidad celular. El gen xyzA no es esencial para la viabilidad celular. El gen xyzA es esencial y se encuentra en copia doble.

A. El fagémido pALTER se utiliza en el método mutS para la selección positiva de antibióticos. B. El fagémido pALTER confiere resistencia a tetR ampR. Solo A verdadera. A y B falsas. Solo B verdadera. A y B verdaderas.

A. El gen dut codifica para UTPasa que degrada el UTP. B. Los dNTP que entran a formar parte del DNA son siempre dATP, dGTP, dCTP y dTTP. Solo A verdadera. A y B falsas. Solo B verdadera. A y B verdaderas.

Hemos usado el transposón Tn5 para realizar mutaciones en el genoma de una especie bacteriana. Se han obtenido 3547 mutantes resistentes a kanamicina, pero ninguno de ellos ha interrumpido el gen X. ¿Qué puede decir de ese gen X?. que el gen X codifica para una aminoglicosido fosfotransferasa. que el gen X no existe en esa especie bacteriana. que el gen X es esencial para la viabilidad de esa especie bacteriana. que el X no sea esencial pero que, al formar parte de un operón, produzca efectos polares perjudiciales para esa especie bacteriana. ninguna de las respuestas anteriores es correcta.

¿Cuál de los siguientes enzimas produce un corte en la hebra de DNA no modificada con fosforotioatos?. BamHI. PstI. AvaI. EcoRI. SalI.

¿En qué condiciones estimaría oportuno cambiar el promotor de un gen que codifica para un enzima extracelular con el fin de incrementar su expresión? Seleccione una: si los niveles de la proteína en el medio de cultivo son bajos. si la secuencia del promotor se aleja de la secuencia canónica. si la replicación del DNA es lenta. si el nº de copias del gen en el cromosoma es bajo. si los niveles de RNAm específicos son bajos.

¿Cuál de los siguientes compuestos se usa en el proceso de degradación de Edman?. Formilisocianato. fenilisotiocianato. fenilcianocrilato. isopropiltiocianato.

¿Qué DNA polimerasa se debe usar en los métodos de mutagénesis in vivo que usan más de un primer mutagénico?. E. coli DNA polimerasa. Taq polimerasa. Ninguno de los anteriores. T4 DNA polimerasa. Fragmento Klenow.

A) Las técnicas de mutagénesis in vitro no siempre utilizan DNAss como molde. B) La técnica de mutagénesis in vitro sólo se puede usar para la mutación de secuencias codificantes. A y B verdaderas. solo A verdadera. solo B verdadera. A y B falsas.

A. La DNA polimerasa comienza a sintetizar la cadena complementaria del DNAss molde desde el extremo 3’ del oligonucleótido mutagénico. B. El 100% de los plásmidos obtenidos por mutagénesis in vitro son mutantes, ya que la técnica es muy efectiva y hace innecesario el uso de métodos de selección posteriores en E.coli. A y B verdaderas. solo A verdadera. solo B verdadera. A y B falsas.

A. La cepa de Escherichia coli usada en la USE mutagénesis es dut-ung-. B. La cepa de E. coli usada en DpnI-mutagénesis por PCR es dam-. Solo A verdadera. A y B falsas. Solo B verdadera. A y B verdaderas.

Las cepas dut- acumulan: dCTP. dTTP. dUTP. ATP. UTP.